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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

卡坦正青霉PRF1 (Perforin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium katangense

摩洛哥芽孢桿菌PMP3 (Peroxisomal Membrane Protein 3) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

熱帶假絲酵母PPAR-γ (Peroxisome Proliferator-activated receptor γ) ELISA Kit拉丁屬名: Candida tropicalis

發狀孢囊游動放線菌PPAR-α (Peroxisome Proliferators-activator Receptors alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Actinoplanes capillaceus

秦氏蜜環菌PT-IgA (Pertussis virus IgA) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

灰耳擔布勒酵母PI Ab-IgG/IgM (phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 拉丁屬名: Auriculibuller fuscus

巴氏醋桿菌羅旺亞種PS (Phosphatidylserine) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacter  pasteurianus subsp. lovaniensis

傘枝犁頭霉P-PKC (Phospho Protein Kinase C) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia corymbifera

沙漠畢赤酵母pERK (Phospho-Extracellular Signal-Regulated Kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Pichia deserticola

黑曲霉PI3K2a (Phosphoinositide 3 Kinase 2a) ELISA Kit  拉丁屬名: Aspergillus  niger

葡萄座腔菌PLA1 (Phospholipase A1) ELISA Kit  注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

芽孢桿菌屬PLAA (Phospholipase A1 Activating Protein) ELISA Kit  拉丁屬名: Bacillus  sp.

短芽孢桿菌LDLR (Low Density Lipoprotein Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pumilus

仙臺鏈霉菌PLCg1 (Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit  用途: 產生代謝產物具有抑菌活性

阪崎克羅諾桿菌PI3K (Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit拉丁屬名: Cronobacter  sakazakii
山羊RT-腦脊髓炎病毒探針法熒光定量PCR試劑盒規格Melamine/OVA(ovalbumin)  三聚氰胺與雞卵白蛋白偶聯物Mg-ATP溶液(10mmol/L,pH7.4)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

chloramphenicol/BSA  氯霉素偶聯牛血清白蛋白土貝母苷乙TubeiMoside II中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

chloramphenicol/OVA  氯霉素偶聯雞卵白蛋白蛋白銀線草醇 DPropanoic acid,2-[(1aR,1bS,2R,4aR,4bS,8aS,9R,9aS,10aR,10bS,10cS,11bS)-9-[(acetyloxy)methyl]-1a,1b,2,3,4a,6,8,8a,9,9a,10,10a,10b,10c,11,11b-hexadecahydro-2-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-1b,10b-dimethyl-3,6-dioxocyclopropa[4,5]cyclopropa[4',5']cyclopent[1',2':7,8]acephenanthryleno[10a,10-b]furan-4(1H)-ylidene]-,methyl ester, (2Z)-對照藥材 分 子 式: C33H38O9 分 子 量:

Gentamicin/BSA  慶大霉素偶聯牛血清白蛋白5,7-二乙酰氧基黃酮4-Oxo-2-phenyl-4H-chromene-5,7-diyl diacetate對照藥材 分 子 式: C19H14O6 分 子 量: 338.31086

Gentamicin/OVA  慶大霉素偶聯雞卵白蛋白辛辣內酯ASpiro[furo[2',3':5,6]cyclohepta[1,2-b]pyran-6(2H),6'(1'aH)-[5H]oxireno[4,5]cyclohepta[1,2-b]furan]-2,5'-dione,7-acetyl-2',3,3',3'a,3a,4,4a,6'a,7',7'a,8a,9,10,10a-tetradecahydro-8a-hydroxy-2',9-dimethyl-3-methylene-1'a-[(1E)-3-oxo-1-buten-1-yl]-,(1'aR,2'R,3'aS,3aR,4aR,6R,6'aR,7'aR,8aR,9S,10aR)-中藥標準品  分 子 式: C29H34O9 分 子 量:

Tetracycline/BSA  四環素偶聯牛血清白蛋白曲克蘆丁trihydroxyethylrutin中藥標準品  分 子 式: C33H42O19 分 子 量: 742.68

Gentamicin/FITC  熒光素標記慶大霉素漆黃素； 紫鉚素7,3,4-Trihydroxyflavanone化學標準品 分 子 式: C15H12O5 分 子 量: 272.25278