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PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。
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金針菇（黃）GLUT1 (Glucose Transporter 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

大腸埃希菌5-LO (Arachidonate 5-Lipoxygenase) ELISA Kit拉丁屬名: coli

pCMV-Gluc12-LO (Arachidonate 12-Lipoxygenase) ELISA Kit規格: 1ml甘油管1支，20ul質粒，一般次日下午

圍小叢殼菌15-LO (Arachidonate 15-Lipoxygenase) ELISA Kit拉丁屬名: Glomerella cingulata

粉色小菇NOS1/nNOS (Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

楚科奇海科維爾氏菌BFP (Brain Finger Protein) ELISA Kit  拉丁屬名: Colwellia chukchiensis

豬鏈球菌II型S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

未定德研所菌S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) ELISA Kit拉丁屬名: Desemzia incerta

黑腐皮殼屬S100A10 (S100 Calcium-binding Protein A10) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

弗氏檸檬酸桿菌PLA2G2D (Phospholipase A2, Group IID) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母cPLA2 (Phospholipase A2, Cytosolic) ELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

淺玫瑰鏈霉菌iPLA2 (Phospholipase A2, Calcium Independent ) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces roseolus

楊鏈格孢SAA2 (Serum Amyloid A2) ELISA Kit拉丁屬名: Alternaria populi

耶納農球菌 RTN4 (Reticulon 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Agrococcus jenensis
貓嗜衣原體探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Alpha-ENaC  鈉通道蛋白α ENaC免疫染色一抗稀釋液標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

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ROM-K/KCNJ1  ATP調節鉀離子通道ROM K抗體花椒毒酚7H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one,9-hydroxy-中藥標準品  分 子 式: C11H6O4 分 子 量: 202.16294

Calsequestrin  肌鈣集蛋白/收鈣素抗體馬來酸Maleic acid中藥標準品  分 子 式: C4H4O4 分 子 量: 116.07216

Syncytin 1/HERV  合胞素1抗體酸棗仁皂苷BJujuboside B中藥標準品  分 子 式: C52H84O21 分 子 量: 1045.21

TASK 3/KCNK9  酸敏感性鉀離子通道蛋白抗體9-甲氧基喜樹堿1H-Pyrano[3',4':6,7]indolizino[1,2-b]quinoline-3,14(4H,12H)-dione,4-ethyl-4-hydroxy-9-methoxy-, (4S)-中藥標準品  分 子 式: C21H18N2O5 分 子 量: 378.38