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上海聯祖生物科技有限公司
產品展廳
阪崎腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯祖
  • 產地:進口、國產
  • 貨號:LZR3547
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-01-13
產品詳請
產地 進口、國產
品牌 聯祖
貨號 LZR3547
用途 公司產品僅用于科研
包裝規格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

產品名稱

英文名稱

貨號

阪崎腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Enterobacter sakazaki

LZR3547

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟

溫度

時間

循環數

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規參照基因,較佳地管家基因,優選地為RPPH1的擴增區域,其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數,計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值,即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:

長枝木霉 PSAP (Prosaposin) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌CD23/FcεRII (Receptor II for the Fc Region of Immunoglobulin E) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

毛栓孔菌PAIg (Platelet Associated Immunoglobulins) ELISA Kit拉丁屬名: Trametes hirsuta

藍微褐鏈霉菌RAG-2 (Recombination Activating Gene 2) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces cyaneofuscatus

紫紅鏈霉菌Ext-N (N-Terminal Extein) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces violaceoruber

節桿菌cTn-I/TNNI3 (cardiac Troponin I) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter  livingstonensis

猴頭菌FLNα (Filamin A, Alpha) ELISA Kit用途: 食藥用菌

尖頂鹽單胞菌NT (Neurotensin) ELISA Kit拉丁屬名: Halomonas arcis

嗜果黑星菌GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

糞腸球菌PLB (Phospholipase B) ELISA Kit拉丁屬名: Enterococcus  faecalis

努比鹵地無氧芽孢桿菌GHAb (Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Anoxybacillus  rupiensis

草酸青霉GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium oxalicum

卡伍爾鏈霉菌HPR (Haptoglobin Related Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces cavourensis Skarbek and Brady

擬胞囊菌OXB (Orexin B) ELISA Kit拉丁屬名: Kibdelosporangium sp.

多主葡萄殼菌CTACK (Cutaneous T-cell Attracting Chemokine) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
阪崎腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書RRBP1  核糖體結合蛋白1抗體強力霉素doxycycline中藥標準品  分 子 式: C22H24N2O8 分 子 量: 444.44

S100A7/Psoriasin  S100鈣結合蛋白A7抗體枸櫞酸鈉抗凝劑(3.2%,無菌)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

RBBP6  視網膜母細胞瘤結合蛋白6抗體大果桉醛 NMacrocarpal N對照藥材 分 子 式:  分 子 量:

S100PBP/S100P binding protein  S100P結合蛋白抗體四乙酸堪非醇酯2-(4-Acetoxyphenyl)-4-oxo-4H-chromene-3,5,7-triyl triacetate對照藥材 分 子 式: C23H18O10 分 子 量: 454.38302

SAMD14  SAMD14抗體單葡萄糖醛酸甘草次酸b-D-Glucopyranosiduronic acid, (3b,20b)-20-carboxy-11-oxo-30-norolean-12-en-3-yl化學標準品 分 子 式: C36H54O10 分 子 量: 646.80796

CDMP1/GDF5  軟骨衍生形態發生蛋白1抗體沒食子酸辛酯Octyl gallate中藥標準品  分 子 式: C15H22O5 分 子 量: 282.33218

RNA polymerase II CTD repeat YSPTSPS (phospho S2)  磷酸化RNA聚合酶II CTD抗體重樓皂苷E化學標準品 分 子 式: C51H82O20 分 子 量: 1015.18478

 


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