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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3558
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-04-30
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3558 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
性大腸桿菌O157血清型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Enterohemorrhagic E. coli(EHEC) | LZR3558 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
金黃殼囊孢PLCβ1/PI-PLC (Phospholipase C Beta 1, Phosphoinositide Specific) ELISA Kit拉丁屬名: Cytospora chrysosperma
暗孢毛殼TERT (Telomerase Reverse Transcriptase) ELISA Kit拉丁屬名: Chaetomium atrosporum
白黑鏈霉菌PDI (Protein Disulfide Isomerase) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces alboniger
灰樹花MGST1 (Microsomal Glutathione S Transferase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Grifola frondosa
植物乳桿菌CALD (Caldesmon) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus plantarum
沼澤紅假單胞菌NRG-1 (Neuregulin 1) ELISA Kit用途: 用于微生物肥料，水產(chǎn)養(yǎng)殖，污水處理
枯草芽孢桿菌GDF5 (Growth Differentiation Factor 5) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus subtilis
不動(dòng)桿菌NOX1 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Acinetobacter sp.
ArthrobacterNPYR5 (Neuropeptide Y Receptor Y5) ELISA Kit拉丁屬名: Arthrobacter phenanthrenivorans
德氏乳桿菌保加利亞亞種LOXL4 (Lysyl Oxidase Like Protein 4 ) ELISA Kit拉丁屬名: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus
黃桿菌SDF-4 (Stromal Cell Derived Factor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Flavobacterium beibuense
新城疫病毒CCL1 (Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit拉丁屬名: Newcastle disease virus
枯草芽孢桿菌TTN (Titin) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
沙阿霉素鏈霉菌ADMA (Asymmetrical Dimethylarginine) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces zaomyceticus
棲沙鹽水孢菌GATA4 (GATA Binding Protein 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Salinispora arenicola
性大腸桿菌O157血清型探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格ADA/Adenosine deaminase 腺苷脫氨酶抗體PBS-BSA溶液(含鈣鎂,1%BSA)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Cryopyrin/CIAS1/NALP3 細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體紫杉醇CTAXOL C(P) 中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C46H57NO14 分 子 量: 847.943080000001
Cyclin B2 周期素B2抗體2,4,6,6-四甲基-3(6H)-吡啶酮2,4,6,6-Tetramethylpyridin-3(6H)-one對(duì)照藥材 分 子 式: C9H13NO 分 子 量: 151.20562
PRX/periaxin 軸周蛋白PRX抗體福爾馬林-硫酸鋅固定液(10%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Calumenin/CALU 鈣腔蛋白三乙酸柚皮素酯2-(4-Acetoxyphenyl)-4-oxochroman-5,7-diyl diacetate對(duì)照藥材 分 子 式: C21H18O8 分 子 量: 398.36282
CD98 CD98重鏈抗原抗體DNA保存液標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式: 分 子 量:
Emerin Emerin蛋白抗體4',6-二甲基-2-羥基苯乙酮1-(2-Hydroxy-4,6-dimethoxyphenyl)ethanone對(duì)照藥材 分 子 式: C10H12O4 分 子 量: 196.19988
