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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

朱紅鏈霉菌UCHL1 (Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces cinnabarinus

煙曲霉PPIL1 (Peptidylprolyl Isomerase/Cyclophilin Like 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

越桔假絲酵母PG (Proteoglycan) ELISA Kit拉丁屬名: Candida vaccinii

巨孢毛霉FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Mucor gigasporus

兩型孢毛霉AhR (Aryl Hydrocarbon Receptor) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor dimorphoporus Lendner

扣囊復膜孢酵母IDE (Insulin Degrading Enzyme) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomycopsis fibuligera

黑曲霉LIPC (Lipase, Hepatic) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  niger

大腸埃希菌C3b (Complement Fragment 3b) ELISA Kit拉丁屬名: coli

枯草芽孢桿菌HBβ (Hemoglobin Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis

溜曲霉α2-PI (α2-Plasmin Inhibitor) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus  tamarii

球孢白僵菌ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

金針菇F5ERCC1 (Excision Repair Cross Complementing Rodent Repair Deficiency Complementation 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

鼠李糖乳桿菌CLDN3 (Claudin 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus  rhamnosus

膠囊青霉GCSFR (Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium capsulatum

深紅酵母PTPRJ (Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
豬附紅細胞體探針法熒光定量PCR試劑盒供應商YY1AP1/HCCA2  相關蛋白2抗體（轉錄因子YY1結合蛋白1抗體）異去甲蟛蜞菊內脂Isodemethylwedelolacton中藥標準品  分 子 式: C15H8O7 分 子 量: 300.21982

ZNF146  鋅指蛋白146抗體Seliwanoff試劑標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

ZNF23  鋅指蛋白23抗體掌葉半夏堿戊Pedatisectine F化學標準品 分 子 式: C9H14N2O4 分 子 量:

ZNF364/BCA2/RNF115  相關基因2抗體（鋅指蛋白364）去甲氧基矢車菊黃酮素4H-1-Benzopyran-4-one,5,7-dihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-6-methoxy-對照藥材 分 子 式: C17H14O7 分 子 量:

FAM89B/MMTV-R  病毒受體同源蛋白抗體DL-色氨酸2-Amino-3-(1H-indol-3-yl)propanoic acid化學標準品 分 子 式: C11H12N2O2 分 子 量: 204.22518

IL-11RA  白介素11受體α/IL-11Rα抗體米托拉酮Mitoflaxone中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

KCNQ-1  鉀離子通道蛋白家族KCNQ1抗體三白草酮SAUCHINONE中藥標準品  分 子 式: C20H20O6 分 子 量: 356.3692