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人舌磷癌細胞CAL33實驗操作步驟

發表時間:2024-12-16
人舌磷癌細胞CAL33實驗操作步驟續寫如下:

在完成細胞培養的基本準備后,接下來進行CAL33細胞的傳代操作。首先,將培養瓶中的舊培養基輕輕吸出,注意避免吸到細胞層,以防細胞損失。然后,向培養瓶中加入適量的無菌磷酸鹽緩沖液(PBS),輕輕搖晃培養瓶,洗滌細胞表面,以去除殘留的血清和代謝產物。再次吸出PBS后,加入適量的胰蛋白酶-EDTA溶液,覆蓋細胞層,輕輕搖晃使胰蛋白酶均勻分布。

將培養瓶置于37℃、5% CO2的培養箱中,靜置約3-5分鐘,或直至在顯微鏡下觀察到細胞開始變圓并脫離培養瓶壁。此時,迅速向培養瓶中加入等體積的完全培養基,以中和胰蛋白酶的活性。使用吸管輕輕吹打細胞懸液,使細胞完全分散成單個細胞。

接下來,根據實驗需要,將細胞懸液按一定比例分配到新的培養瓶中,補充完全培養基至適當體積。輕輕搖晃培養瓶,使細胞均勻分布。最后,將培養瓶放回37℃、5% CO2的培養箱中繼續培養,定期觀察細胞生長情況,并根據需要更換培養基。

在CAL33細胞的實驗過程中,還需注意無菌操作,避免細胞污染。同時,要記錄細胞傳代的次數和時間,以便后續實驗分析和數據整理。此外,根據實驗目的的不同,還可以對CAL33細胞進行基因操作、藥物處理或細胞功能檢測等實驗。
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